本发明涉及蚓激酶制备领域，尤其涉及一种蚓激酶提取方法。
背景技术：
蚓激酶已被证明有较好的临床应用价值，它是一种多分子重组口服制剂，与血栓（纤维蛋白）有特殊的亲和力，能够跟踪溶栓，有效溶解微栓，改善微循环，加强心、脑血管侧支循环，开放性修复血管受损内皮细胞，增加血管弹性，改善血管供氧功能，降低血液粘度，降低血小板聚集率，抑制血栓再次形成。修复血栓发生后周边坏死脑细胞，挽救半暗区。目前已广泛用于临床，并越来越多地用在心、脑血管、内分泌，呼吸系统等疾病的预防和治疗中心。
传统的煎煮提取方法使其中大部分有效成分变性，丧失活性。
为提高蚓激酶的活性，申请号为201110103216.7的发明专利申请公开了一种高活性蚓激酶的制备方法，主要包括清洗、沉淀、超滤、盐析、离子交换等步骤，得到酶活超过40000u/mg的蚓激酶；
为得到蚓激酶和蚯蚓蛋白，申请号为201711462748.3的发明专利申请公开了一种蚯蚓中蚯蚓蛋白和蚓激酶的提取方法，主要包括水洗、匀浆、沉淀、盐析、浓缩、超滤、浓缩、酶解、超滤等步骤，得到蚓激酶和6500da蚯蚓多肽；
为得到低免疫性蚓激酶，申请号为201210123955.7的发明专利申请公开了一种低免疫原性蚓激酶及其制备方法和应用，首先从蚯蚓中提取得到蚓激酶粗品，然后粗品通过离子交换柱进行洗脱，纯化，收集具有纤溶活性的组分，冷冻干燥浓缩，浓缩后的蚓激酶溶液用凝胶过滤色谱柱进行分离，用琼脂糖-纤维蛋白平板法检测纤溶活性，收集具有纤溶活性的第二个洗脱峰，经sds-page电泳检测，其分子量为23500-27500da，洗脱峰经透析脱盐低温冷冻干燥后采用活化的单甲氧基聚乙二醇以及右旋糖酐对其进行分子修饰，能够得到活力为31400iu/mg的蚓激酶；
以上三种方法均通过各自的技术方案得到蚓激酶，并能够对蚓激酶的质量进行提高，但制备步骤复杂，制备过程中使用的设备成本高、产率低。
为降低生产成本，保证蚓激酶产率，申请号为200910231486.9的发明专利申请公开了一种蚓激酶制备工艺方法，主要包括清洗、磨浆、除渣、盐析、离心、超滤、柱层析分离、超滤、过滤、除菌、喷干等步骤。
申请号为200910231486.9的发明提供的技术方案制备步骤依然复杂，生产效率低。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种制备成本低、生产效率高、制备步骤简单的蚓激酶提取方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种蚓激酶提取方法，包括以下步骤，
步骤一，水提，将蚯蚓粉投入搅拌罐中，常温下第一次加15倍蚯蚓量饮用水，开启搅拌，搅拌15-20min后关闭搅拌，浸泡3小时，第二次加10倍蚯蚓量饮用水，搅拌15-20min，浸泡静置8小时，得到蚯蚓水提混合液；
步骤二，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液；
步骤三，分离，将步骤二得到的预分离液放入离心机中，离心得到下层离心膏；
步骤四，干燥，将步骤三得到的下层离心膏进行干燥，得到块状蚓激酶提取物；
步骤五，粉碎，将步骤四得到的块状蚓激酶提取物粉碎，得到成品蚓激酶，
步骤二中，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液包括以下步骤，
a，将蚯蚓水提混合物投入储罐，通过泵将储罐内的蚯蚓水提混合物引流经过带有滤网的过滤管道，过滤得到含有蚓激酶的清夜；
b，将含有蚓激酶的清夜通过泵引流至横向的浓缩罐中，通过泵将浓缩罐中的气压控制在-0.08--0.1mpa，通入蒸汽进行浓缩，得到密度为1.1-1.2g/ml的浓缩液；
c，将浓缩液通过泵引流至横向的醇沉罐内，加入乙醇，浓缩液自醇沉罐的进口端流向出口端，得到预分离液；
d，将醇沉液通过泵引入暂存箱中，备用。
进一步地，步骤一中，控制温度23-30℃，搅拌速度90-120rpm。
进一步地，步骤三中离心机为管式离心机，转速为11000-13000rpm。
进一步地，步骤四中控制温度10-15℃。
进一步地，步骤a中，滤网为100目滤网。
进一步地，所述连续分离设备包括底座，所述底座上设置有储罐，所述储罐上端设置有投料口，所述储罐上端还设置有气口，所述气口处设置有过滤器，所述储罐下端设置有出液管，所述出液管的出口处连通有带有滤网的过滤管道，所述过滤管道的出口端通过管路一连通至横向的浓缩罐，所述管路一上设置有指向浓缩罐的单向阀一，所述浓缩罐的进口端上侧连接有蒸汽发生装置，所述浓缩罐的出口端通过管道连通至横向的醇沉罐，所述醇沉罐的进口端连通有乙醇罐，所述醇沉罐的进口端和出口端之间连接有循环泵，所述醇沉罐的出口端设置有循环出管，所述循环出管的进口端距醇沉罐下底面的距离值为醇沉罐总高度值1/4-1/3，所述醇沉罐的出口端下侧连通有出料管，所述出料管上设置有齿轮泵，所述齿轮泵对浓缩罐及醇沉罐抽负压，所述齿轮泵的出口端通过管道连通至暂存箱，所述暂存箱的安装高度值高于齿轮泵，所述暂存箱的底部设置有放料管，所述暂存箱下端还设置有带有阀门的检验管，所述检验管下侧的底座上设置有取样架。
进一步地，过滤管道上设置有用于滤除料渣的过滤装置，所述过滤装置包括过滤箱体，所述过滤箱体上设置有滤网插装口，所述滤网插装口处可拆卸的插装有滤网架，所述滤网架包括位于过滤箱体外侧的底板，所述底板下端面设置有2-3个相互平行的滤网框，所述滤网设置在滤网框内，所述滤网插装口处设置有与滤网框相对应的阻挡板，所述滤网框上与阻挡板相对应位置处设置有密封圈，所述底板上端面设置有吊环，所述过滤箱体上端位于滤网插装口两侧设置有向上的螺杆，相应两螺杆之间设置有用于向下压紧底板的横杆，所述横杆两端穿装在相应的螺杆上，所述螺杆上位于横杆上侧套装有螺母，所述底板下端面设置有用于与滤网箱体之间密封的密封环，所述过滤箱体下端位于过滤网插装口的进口侧设置有向下的排渣口，所述排渣口下侧连接有带有阀门的排渣管，所述排渣管下端连通有集渣罐，所述集渣罐下端设置有带有阀门的清渣管。
进一步地，所述蒸汽发生装置包括设置在底座上的箱体，所述箱体内设置有循环风机，所述循环风机的进风口连通至浓缩罐的出口端，所述箱体内还设置有蒸汽发生箱，所述蒸汽发生箱内设置有电热管，所述蒸汽发生箱的出气管连通至浓缩罐的进口端，所述蒸汽发生箱的进气管与循环风机的出风口连通，所述蒸汽发生箱的下端设置有带有阀门的放液管，所述浓缩罐上设置有气压表。
进一步地，所述取样架包括设置在底座上的立柱，所述立柱上端设置有用于放置取样试管的旋转架，所述旋转架包括与立柱同轴线设置的试管支撑板，所述试管支撑板上环绕立柱均匀设置有多个试管插孔，所述试管支撑板下侧的立柱上设置有用于托举试管的托板，所述托板与试管支撑板均为圆板，所述托板与试管支撑板均通过轴承同轴线套装在立柱上，所述托板与试管支撑板之间固定有连接柱，所述托板上表面设置有弹性垫。
进一步地，所述储罐为立式储罐，所述底座上设置有用于支撑储罐的固定架。
本发明的有益效果在于：本发明提供的蚓激酶提取方法，主要包括水提、预分离、分离、干燥、粉碎步骤，步骤简单，在搅拌罐中能够大量的进行水提，然后分批投入连续分离设备中，在连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉步骤，整个提取方法中仅引入乙醇、蒸汽，成本低，除连续分离设备外，仅需使用搅拌罐、离心机、干燥设备和粉碎设备即可，操作方便，中间环节少，能够有效的避免细菌的引入，保证蚓激酶质量，连续分离设备中，将过滤、浓缩、醇沉集成到一个底座上，方便调整和连接，同时方便控制和维护，水提液由储罐放入，至暂存箱得到经过醇沉的预分离液，不需要转运，操作方便，生产效率得到提高。
附图说明
图1为实施例1中连续分离设备各部件连接关系图示意图；
图2为过滤装置主视剖面图示意图；
图3为图2中a处局部放大图示意图；
图4为滤网插口结构图示意图；
图5为蒸汽发生装置结构图示意图；
其中：1-底座，2-支腿，3-固定架，4-储罐，5-过滤器，6-端盖，7-阀门，8-过滤箱体，9-集渣罐，10-浓缩罐，11-箱体，12-气压表，13-乙醇罐，14-支架，15-循环出管，16-醇沉罐，17-循环泵，18-单向阀一，19-齿轮泵，20-暂存箱，21-放料管，22-立柱，23-检验管，24-试管支撑板，25-托板，26-试管，27-连接柱，28-放液管，29-清渣管，30-滤网插装口，31-底板，32-密封环，33-螺杆，34-横杆，35-螺母，36-滤网框，37-滤网，38-吊环，39-框架，40-插槽，41-循环风机，42-蒸汽发生箱，43-电热管，44-密封圈。
具体实施方式
在本发明的描述中，还需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“设置”、“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
下面将结合发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下各实施例中，连续分离设备如附图1-5所示，包括底座1，底座1由工字钢焊接搭建而成，稳定性高，重量轻，底座1下端焊接有支腿2，方便与地基之间连接，底座1上通过固定架3安装有储罐4，储罐为立式储罐，容量为3立方米，储罐由不锈钢材料制成，储罐上端加工有投料口，投料口处有端盖6，储罐上端还加工有气口，气口处安装有过滤器5，通过过滤器能够过滤细菌及灰尘，避免污染蚓激酶，储罐下端安装有出液管，出液管的出口处连通有带有滤网的过滤管道，过滤管道上安装有用于滤除料渣的过滤装置，过滤装置包括过滤箱体8，过滤箱体为不锈钢箱体，过滤箱体上安装有滤网插装口30，滤网插装口处可拆卸的插装有滤网架，具体为，滤网插装口包括矩形的框架39，框架上加工有3个相互平行的插槽40，滤网架包括位于过滤箱体外侧的底板31，底板下端面密封固定有3个相互平行的滤网框36，滤网37安装在滤网框内，滤网框由不锈钢材料制成，厚度值为3mm，滤网框内加工有用于插装滤网的插槽，任一滤网框对应的滤网有2层，目数为100，两层滤网层叠后边缘粘合，然后插装在沟槽内，通过树脂胶固定，经过20-22h、40-50℃的时效处理，使树脂胶内的挥发性物质释放，避免污染蚓激酶，滤网插装口处安装有与滤网框相对应的阻挡板，相邻两个阻挡板之间形成用于插装滤网框的插槽，滤网框上与阻挡板相对应位置处粘附有密封圈44，密封圈为天然橡胶圈，底板上端面安装有吊环38，方便移动滤网架，滤网架为易损件，需要定时检查更换，过滤箱体上端位于滤网插装口两侧焊接有向上的螺杆33，螺杆有四个，呈矩形分布，相应两螺杆之间安装有用于向下压紧底板的横杆34，横杆两端穿装在相应的螺杆上，螺杆上位于横杆上侧套装有螺母35，拧紧螺母，横杆向下推动底板，进而使底板与过滤箱体之间压紧，方便拆装、更换，底板下端面安装有用于与滤网箱体之间密封的密封环32，密封环为聚丙烯环，密封效果好，过滤箱体下端位于过滤网插装口的进口侧加工有向下的排渣口，排渣口下侧连接有带有阀门的排渣管，排渣管下端连通有集渣罐9，集渣罐下端安装有带有阀门7的清渣管29。
过滤管道的出口端通过管路一连通至横向的浓缩罐10，管路一上安装有指向浓缩罐的单向阀一18，浓缩罐的进口端上侧连接有蒸汽发生装置，蒸汽发生装置包括安装在底座1上的箱体11，箱体内安装有循环风机41，循环风机为罗茨风机，循环风机的进风口连通至浓缩罐的出口端，箱体内还安装有蒸汽发生箱42，蒸汽发生箱内安装有电热管43，蒸汽发生箱的出气管连通至浓缩罐的进口端，蒸汽发生箱的进气管与循环风机的出风口连通，蒸汽发生箱的下端安装有带有阀门的放液管28，浓缩罐上安装有气压表12，通过电热管能够使蒸汽发生箱内产生水蒸气，水蒸气进入浓缩罐中，对浓缩罐内的物料进行加热浓缩，随着浓缩步骤的持续，蒸汽发生箱内的水增加，通过放液管定期放水，能够保证浓缩罐正常工作，由于在使用的过程中，浓缩罐内为负压，使用过程中放水需要使用泵与放液管连通。
浓缩罐的出口端通过管道连通至横向的醇沉罐16，醇沉罐的进口端连通有乙醇罐13，醇沉罐的进口端和出口端之间连接有循环泵，醇沉罐的出口端安装有循环出管，循环出管的进口端距醇沉罐下底面的距离值为醇沉罐总高度值1/3，通过乙醇罐能够向醇沉罐内补充95%的乙醇，通过循环泵能够将醇沉罐出口端处的上层液抽送至醇沉罐的进口端，能够减小乙醇的用量，醇沉罐的出口端下侧连通有出料管，出料管上安装有齿轮泵19，齿轮泵对浓缩罐及醇沉罐抽负压，齿轮泵的出口端通过管道连通至暂存箱20，暂存箱的安装高度值高于齿轮泵，本实施例中，由于齿轮泵有较高的扬程，将暂存箱安装在高处，能够避免喷射，同时方便取出，暂存箱的底部安装有放料管21，通过放料管能够将暂存箱内的预处理液取出，为方便提取预处理液进行检测，暂存箱下端还安装有带有阀门的检验管23，检验管下侧的底座1上安装有取样架，取样架包括安装在底座1上的立柱22，立柱上端安装有用于放置取样试管26的旋转架，旋转架包括与立柱同轴线安装的试管支撑板24，试管支撑板上环绕立柱均匀加工有多个试管插孔，试管支撑板下侧的立柱上安装有用于托举试管的托板25，托板与试管支撑板均为圆板，托板与试管支撑板均通过轴承同轴线套装在立柱上，托板与试管支撑板之间固定有连接柱27，保证托板与试管支撑板之前同步转动，托板上表面安装有弹性垫，弹性垫为无纺布垫，避免试管与托板刚性接触，通过旋转取样架能够使试管正对检验管取样，取样后旋转取样架，取出试管。
集渣罐、箱体、循环泵、浓缩罐、醇沉罐、乙醇箱、暂存罐和底座1之间均通过支架14固定。
安装完成后，在浓缩罐和储罐之间安装有指向过滤罐的单向阀一，在使用的过程中，先通入75%乙醇，对连续分离设备进行消毒，然后通入蒸馏水清洗，关闭阀门，在储罐内投入经过水提的蚯蚓水提混合液、在乙醇罐内投入95%的乙醇、在蒸汽发生箱内注入蒸馏水，在浓缩罐及醇沉罐内注入蒸馏水，注入量分别为二者容积的1/2，然后打开相应阀门，通过齿轮泵对醇沉罐、浓缩罐抽真空，至气压表示值为-0.1mpa，在此过程中，由于压力差的作用，单向阀一，开启相应阀门、循环风机、循环泵、电热管，开启工作，储罐中的蚯蚓水提混合液经过过滤后进入浓缩罐进行浓缩，然后进入醇沉罐进行醇沉，最后进入暂存箱中，间隔3min对暂存箱内的物料进行放料，同时进行取样，取样后进行离心沉淀，检测沉淀物，待相邻三次检测沉淀物中蚓激酶含量稳定，通过调整齿轮泵转速、调整电热管功率、调整乙醇流速、调整蚯蚓水提混合液流速，每次调整完成后间隔1min，取样检测，至沉淀物蚓激酶含量达到预定值，记录齿轮泵转速、电热管功率、乙醇流速参数、蚯蚓水提混合液流速，用于正常生产。
在生产的过程中，需要定期对蒸汽发生箱进行放水，对集渣罐进行排渣，更换滤网。
在使用的过程中，由于滤网两侧存在压差，滤网框摆动，滤网框通过密封圈与挡板压紧，从而达到更好的密封效果。
实施例1
一种蚓激酶提取方法，包括以下步骤，
步骤一，水提，将蚯蚓粉投入搅拌罐中，常温下第一次加15倍蚯蚓量饮用水，开启搅拌，搅拌15min后关闭搅拌，浸泡3小时，第二次加10倍蚯蚓量饮用水，搅拌18min，浸泡静置8小时，得到蚯蚓水提混合液，期间，控制温度24℃，搅拌速度90-120rpm，通过11个小时水提，能够将水溶性的蚓激酶提取到浆液中，方便提纯；
步骤二，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液，在过滤的过程中，滤网为100目滤网，能够将渣滓滤除，同时使浆液通过，对蚓激酶进行提取，浓缩的过程中，控制浓缩罐内的气压为0.09mpa，该气压下浆液的沸点是25-35℃，能够在不影响蚓激酶活性的前提下加快蒸发，提高浓缩效率，经过浓缩的料液密度达到1.1-1.2g/ml，蚓激酶浓度得到提高，然后通入95%的乙醇，乙醇与浆液混合致使浆液中乙醇的浓度达到69%，得到预分离液；
步骤三，分离，将步骤二得到的预分离液放入离心机中，离心得到下层离心膏，其中离心机为管式离心机，转速为11000rpm；
步骤四，干燥，将步骤三得到的下层离心膏进行干燥，期间控制温度12℃，得到块状蚓激酶提取物；
步骤五，粉碎，将步骤四得到的块状蚓激酶提取物粉碎，得到成品蚓激酶。
本实施例制备蚓激酶，检测结果见附表1。
实施例2
一种蚓激酶提取方法，包括以下步骤，
步骤一，水提，将蚯蚓粉投入搅拌罐中，常温下第一次加15倍蚯蚓量饮用水，开启搅拌，搅拌18min后关闭搅拌，浸泡3小时，第二次加10倍蚯蚓量饮用水，搅拌15min，浸泡静置8小时，得到蚯蚓水提混合液，期间，控制温度25℃，搅拌速度100rpm，通过11个小时水提，能够将水溶性的蚓激酶提取到浆液中，方便提纯；
步骤二，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液，在过滤的过程中，滤网为100目滤网，能够将渣滓滤除，同时使浆液通过，对蚓激酶进行提取，浓缩的过程中，控制浓缩罐内的气压为0.08-0.1mpa，该气压下浆液的沸点是25-35℃，能够在不影响蚓激酶活性的前提下加快蒸发，提高浓缩效率，经过浓缩的料液密度达到1.1-1.2g/ml，蚓激酶浓度得到提高，然后通入95%的乙醇，乙醇与浆液混合致使浆液中乙醇的浓度达到68-73%，得到预分离液；
步骤三，分离，将步骤二得到的预分离液放入离心机中，离心得到下层离心膏，其中离心机为管式离心机，转速为12000rpm；
步骤四，干燥，将步骤三得到的下层离心膏进行干燥，期间控制温度13℃，得到块状蚓激酶提取物；
步骤五，粉碎，将步骤四得到的块状蚓激酶提取物粉碎，得到成品蚓激酶。
本实施例制备蚓激酶，检测结果见附表1。
实施例3
一种蚓激酶提取方法，包括以下步骤，
步骤一，水提，将蚯蚓粉投入搅拌罐中，常温下第一次加15倍蚯蚓量饮用水，开启搅拌，搅拌15min后关闭搅拌，浸泡3小时，第二次加10倍蚯蚓量饮用水，搅拌20min，浸泡静置8小时，得到蚯蚓水提混合液，期间，控制温度30℃，搅拌速度120rpm，通过11个小时水提，能够将水溶性的蚓激酶提取到浆液中，方便提纯；
步骤二，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液，在过滤的过程中，滤网为100目滤网，能够将渣滓滤除，同时使浆液通过，对蚓激酶进行提取，浓缩的过程中，控制浓缩罐内的气压为0.08-0.1mpa，该气压下浆液的沸点是25-35℃，能够在不影响蚓激酶活性的前提下加快蒸发，提高浓缩效率，经过浓缩的料液密度达到1.1-1.2g/ml，蚓激酶浓度得到提高，然后通入95%的乙醇，乙醇与浆液混合致使浆液中乙醇的浓度达到68-73%，得到预分离液；
步骤三，分离，将步骤二得到的预分离液放入离心机中，离心得到下层离心膏，其中离心机为管式离心机，转速为11000rpm；
步骤四，干燥，将步骤三得到的下层离心膏进行干燥，期间控制温度12℃，得到块状蚓激酶提取物；
步骤五，粉碎，将步骤四得到的块状蚓激酶提取物粉碎，得到成品蚓激酶。
本实施例制备蚓激酶，检测结果见附表1。
实施例4
一种蚓激酶提取方法，包括以下步骤，
步骤一，水提，将蚯蚓粉投入搅拌罐中，常温下第一次加15倍蚯蚓量饮用水，开启搅拌，搅拌20min后关闭搅拌，浸泡3小时，第二次加10倍蚯蚓量饮用水，搅拌18min，浸泡静置8小时，得到蚯蚓水提混合液，期间，控制温度27℃，搅拌速度110rpm，通过11个小时水提，能够将水溶性的蚓激酶提取到浆液中，方便提纯；
步骤二，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液，在过滤的过程中，滤网为100目滤网，能够将渣滓滤除，同时使浆液通过，对蚓激酶进行提取，浓缩的过程中，控制浓缩罐内的气压为0.08-0.1mpa，该气压下浆液的沸点是25-35℃，能够在不影响蚓激酶活性的前提下加快蒸发，提高浓缩效率，经过浓缩的料液密度达到1.1-1.2g/ml，蚓激酶浓度得到提高，然后通入95%的乙醇，乙醇与浆液混合致使浆液中乙醇的浓度达到68-73%，得到预分离液；
步骤三，分离，将步骤二得到的预分离液放入离心机中，离心得到下层离心膏，其中离心机为管式离心机，转速为12000rpm；
步骤四，干燥，将步骤三得到的下层离心膏进行干燥，期间控制温度10-15℃，得到块状蚓激酶提取物；
步骤五，粉碎，将步骤四得到的块状蚓激酶提取物粉碎，得到成品蚓激酶。
本实施例制备蚓激酶，检测结果见附表1。
实施例5
一种蚓激酶提取方法，包括以下步骤，
步骤一，水提，将蚯蚓粉投入搅拌罐中，常温下第一次加15倍蚯蚓量饮用水，开启搅拌，搅拌15min后关闭搅拌，浸泡3小时，第二次加10倍蚯蚓量饮用水，搅拌20min，浸泡静置8小时，得到蚯蚓水提混合液，期间，控制温度26℃，搅拌速度110rpm，通过11个小时水提，能够将水溶性的蚓激酶提取到浆液中，方便提纯；
步骤二，预分离，将步骤一得到的蚯蚓水提混合液放入连续分离设备中进行过滤、浓缩、醇沉，得到预分离液，在过滤的过程中，滤网为100目滤网，能够将渣滓滤除，同时使浆液通过，对蚓激酶进行提取，浓缩的过程中，控制浓缩罐内的气压为0.08-0.1mpa，该气压下浆液的沸点是25-35℃，能够在不影响蚓激酶活性的前提下加快蒸发，提高浓缩效率，经过浓缩的料液密度达到1.1-1.2g/ml，蚓激酶浓度得到提高，然后通入95%的乙醇，乙醇与浆液混合致使浆液中乙醇的浓度达到68-73%，得到预分离液；
步骤三，分离，将步骤二得到的预分离液放入离心机中，离心得到下层离心膏，其中离心机为管式离心机，转速为11000rpm；
步骤四，干燥，将步骤三得到的下层离心膏进行干燥，期间控制温度15℃，得到块状蚓激酶提取物；
步骤五，粉碎，将步骤四得到的块状蚓激酶提取物粉碎，得到成品蚓激酶。
本实施例制备蚓激酶，检测结果见附表1。
附表1
对比例1为申请号为201110103216.7的专利申请提供的技术方案的检测结果，对比例2为申请号为201711462748.3的专利申请提供的技术方案的检测结果，对比例3为申请号为201210123955.7的专利申请提供的技术方案的检测结果，由附表1可以知道本申请提供的蚓激酶提取方法，能够将蚓激酶的收率提高至12%。
本申请提供的蚓激酶提取方法制得的蚓激酶收率高，其酶活力能够达到10000u/mg以上，能够广泛应用与药品配制，具有广泛的市场应用前景。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。